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彗星實驗

時間:2022-01-11 10:24:57 文章來源:中化所 TAG: 點擊::

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  彗星實驗去哪里做?中化所檢測中心可做各類彗星實驗,出具第三方檢測報告。

一、彗星實驗介紹

  “彗星”實驗又稱單細胞凝膠電泳實驗,是一種通過檢測DNA鏈損傷來判別遺傳毒性的技術。它能有效地檢測并定量分析細胞中DNA單、雙鏈缺口損傷的程度。當各種內源性和外源性DNA損傷因子誘發細胞DNA鏈斷裂時,其超螺旋結構受到破壞,在細胞裂解液作用下,細胞膜、核膜等膜結構受到破壞,細胞內的蛋白質、RNA以及其他成分均擴散到電解液中,而核DNA由于分子量太大不能進入凝膠而留在原位。在中性條件下,DNA片段可進入凝膠發生遷移,而在堿性電解質的作用下,DNA發生解螺旋,損傷的DNA斷鏈及片段被釋放出來。在電泳過程中,這些DNA斷鏈及片段帶會離開核DNA 向正極遷移形成“彗星”狀圖像,而未受損傷的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴重,產生的斷鏈和斷片越多,長度也越大,在相同的電泳條件下遷移的DNA量就愈多,遷移的距離就愈長。通過測定DNA遷移部分的光密度或遷移長度就可以測定單個細胞DNA損傷程度,從而確定受試物的作用劑量與DNA損傷效應的關系。該法檢測低濃度遺傳毒物具有高靈敏性,研究的細胞不需處于有絲分裂期。同時,這種技術只需要少量細胞。

二、客戶提供標本或者相關資料

  1. 研究用細胞或組織;

  2. 檢測的指標;

  3. 請客戶提供DNA受損詳細相關信息或相關文獻。

三、單細胞凝膠電泳實驗流程

  1.細胞接種:單細胞凝膠電泳實驗前天接種細胞,各種細胞的平板密度依據各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行單細胞凝膠電泳實驗當天細胞密度應達到60%~80%覆蓋;

  2. DNA損傷處理;

  3. 收集細胞,制備單細胞懸液;

  4. 制備膠板;

  5. 細胞裂解與電泳;

  6. 中和與染色;

  6. 熒光顯微鏡拍照,記錄實驗結果。

四、最終結果

  1. 陰性對照結果;

  2. 具體試驗流程(包括:實驗步驟;主要儀器及試劑說明(含儀器廠家、型號;試劑廠家、批號));

  3. 原始實驗圖片及數據。
彗星實驗

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